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细菌的几种鉴别培养基概述
作者 王苗森发表时间 2018-03-15浏览 评论

 培养基

1.SS培养基

专用于分离志贺菌和沙门菌,SS琼脂为强选择性培养基。其成分除了有必要的胨、牛肉膏等氮、碳源外,其他则为选择性抑制剂和缓冲剂。

牛胆盐、枸橼酸钠和煌绿抑制革兰氏阳性菌及大多数的大肠菌群和变形杆菌,但不影响沙门氏菌的生长;

硫代硫酸钠和枸橼酸铁铵用于检测硫化氢的产生,使菌落中心呈黑色;中性红为pH指示剂,发酵糖产酸的菌落呈红色,不发酵糖的菌落为无色;

检测结果:

大部分大肠杆菌分解乳糖,呈红色,牛胆盐、枸橼酸钠和煌绿抑制其生长,最终死亡。

志贺菌和沙门菌不分解乳糖,呈无色半透明状,最终存活。

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2.双糖铁培养基

克氏双糖铁琼脂(KIA) 和三糖铁(TSI 的原理和使用方法

KIATSI常用于观察微生物发酵葡萄糖和乳糖的能力,只用KIA一种就可以把肠杆菌科细菌和其他科细菌区别出来。

KIA成分中含有葡萄糖和乳糖,二者比例为 110 指示剂为酚红,其在PH<6.8时变为黄色,而KIAPH7.4,产少量的酸就可导致颜色

变化。

生化原理:

斜面部分暴露于空气中,为有氧环境。而下部与空气隔绝是相对厌氧的环境。因此配KIATSI时,最重要的是斜面部分和管下部琼脂的长度,两者均为3cm ,以保证两部分相对应的有氧或厌氧环境。

用针穿刺时,取单个菌落,穿刺至底部3-5mm处,然后在斜面上往复划线。放35度培养18-24小时。

观察结果:有三种类型

A.非发酵型:无碳氢化合物发酵,所以无酸产生,斜面上琼脂的肽降解产物是碱性物质导致斜面变红。这种类型的细菌称为非发酵型。

B.非乳糖发酵型:如果接种的是发酵葡萄糖不发酵乳糖的细菌,培养基内仅有0.1%葡萄糖可以产酸。开始阶段,培养8-12h时,产生的酸足以引起斜面和底部颜色变成黄色。在接下来的时间里,葡萄糖被完全消耗,斜面部分的细菌在有氧条件下开始氧化降解氨基酸,产生的胺类很快就中和斜面上存在的酸;到18-24h,整个斜面又转换成碱性PH,颜色有变成红色。深部(厌氧区域),氨基酸降解不足以中和形成的酸,培养基仍为黄色。

C.乳糖(蔗糖)发酵型

上层变为黄色,下层红色。

应注意,若细菌产生H2S,则H2S可以与铁盐结合,产生FeS,使菌落变成黑色。

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